Descrizione

Aspetto: polvere amorfa di colore giallo chiaro
Attività specifica: ≥11U/mg
Stabilità: stabile per un anno a -20℃.
Peso molecolare: circa 60KD
Punto isoelettrico: 5,2
Molarità: 1 x 10-4 M (colesterolo)
Inibitore: non inibito dalla sodio azide.
Stabilità del pH: 6,0-10,0 (Fig. 3-1)
pH ottimale: 6,5-7,5 (Fig. 3-2)
Temperatura ottimale: 52°C (Fig. 3-3)
Stabilità termica: stabile fino a 60°C (Fig. 3-4)
Stabilizzatore: gli ioni di potassio aiutano a stabilizzare l'attività enzimatica.

La colesterolo ossidasi (EC1.1.3.6 COD) è sempre più riconosciuta per il suo ruolo nella lavorazione degli alimenti, nei test medici, nel controllo biologico dei parassiti e in altri campi, e ha mostrato un grande potenziale di applicazione.
È un enzima chiave nel processo di metabolismo del colesterolo, dipendente dal coenzima FAD, e può catalizzare in modo specifico la conversione del colesterolo in colest-4-ene-3-one (4-colesterolo-3-one). Come oggetto di ricerca è stato utilizzato E. coli ricombinante che produce COD, con l'obiettivo di sviluppare e applicare il COD. Sono state condotte ricerche sulla separazione ed estrazione del COD, sulle sue proprietà enzimatiche e sull'applicazione dell'enzima. Il COD è stato isolato utilizzando un processo di purificazione che comprendeva il trattamento a ultrasuoni di E. coli ricombinante, la salatura 70% (NH_4)_2SO_4, la cromatografia a scambio ionico CM Sepharose F.F. e la filtrazione su gel fine Sephadex G-75. Il COD estratto e purificato aveva un'attività enzimatica di 47,3 U/mg, un multiplo di purificazione di 45 volte e un tasso di recupero dell'attività enzimatica di 21%.

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