影响酶制剂效果的因素有哪些?
在追求绿色低碳生活的今天,酵素制剂因其高效、安全、无毒副作用、对环境影响小等特点,已经渗透到我们生活的方方面面。比如,我们吃的面包、馒头,喝的果汁、饮料,炒菜用的调料,用的纸质文件,都可以用到酵素制剂。
因此,了解酶制剂的化学性质对于正确使用它们非常重要。
1.pH 值的影响
每种酶只有在特定的 pH 值范围内才能表现出较高的活性,这个 pH 值就是酶作用的最适 pH 值。一般来说,酶在最适 pH 值下最稳定,因此酶作用的 pH 值也是酶稳定的 pH 值。如果酶反应的 pH 值过高或过低,酶就会受到不可逆的破坏,其稳定性和活性就会降低,甚至失去活性。不同酶的最适 pH 值范围不同,可以是酸性、中性或碱性。例如,根据蛋白酶作用的最适 pH 值,通常将其分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。酶发挥作用的 pH 值也是在特定条件下测量的参数。酶作用的最佳 pH 值随温度或底物而变化。温度越高,酶作用的稳定 pH 值范围就越窄。因此,在酶催化反应过程中,必须严格控制反应的 pH 值。
2.温度的影响
在特定条件下,每种酶都有一个最佳作用温度。在这个温度下,酶的活性最高,效果最好,而且相对稳定。酶催化反应的速率增加,酶活性因受热变性而丧失,达到平衡状态。这个温度是酶作用的最佳温度。每种酶都有一个活跃和稳定的温度。在这个温度下,在一定的时间、pH 值和酶浓度条件下,酶相对稳定,不会或很少失去活性。这个温度就是酶的稳定温度。如果在高于稳定温度的条件下使用酶,它就会迅速失去活性。酶的这种热敏感性可以用临界失活温度 Tc 表示,即酶在 1 小时内失去一半活性的温度。因此,一般来说,酶只能在其有效温度范围内有效催化。温度每升高 10℃,酶的反应速率就会增加 1 到 2 倍。温度对酶作用的影响还与酶受热的时间有关。随着反应时间的延长,酶的最适温度会降低。此外,酶反应的底物浓度、缓冲液类型、活化剂和酶的纯度等因素也会改变酶的最适温度和稳定性。
3.酶浓度和底物浓度的影响
在温度、pH 值和酶浓度一定的情况下,底物浓度是决定酶催化反应速率的主要因素。当底物浓度很低时,酶的催化反应速率随底物浓度的增加而迅速增加,两者成正比。随着底物浓度的增加,反应速度减慢,不再成正比。底物浓度与酶催化反应速率之间的关系一般可以用 Michaelis-Menten 方程来表示。有时,当底物浓度很高时,酶的反应速率会因底物抑制而降低。当底物浓度大大超过酶浓度时,酶催化反应速率一般与酶浓度成正比。此外,如果酶浓度过低,酶有时会失去活性,导致反应无法进行。在食品加工过程中进行的酶催化反应中,酶的用量通常远远少于底物的用量,而且还必须考虑到酶的成本。
4.抑制剂的作用
许多物质可以削弱、抑制甚至破坏酶的作用。这些物质被称为酶抑制剂。例如重金属离子(Fe3+、Cu2+、Hg+、Pb+ 等)、一氧化碳、硫化氢、有机阳离子、乙二胺和四乙酸。在实际生产中,了解和避免抑制剂对酶催化作用的影响非常重要。
5.活化剂的作用
许多物质具有保护和提高酶活性的作用,或促进非活性酶蛋白转化为活性酶。这些物质统称为酶活化剂。激活剂可分为三类:第一类是无机离子,如 Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cu2+、Co2+ 和 Zn2+ 等阳离子,以及 Cl-、NO3-、PO43- 和 SO42- 等阴离子。第二类是小分子有机物,主要是 B 族维生素及其衍生物。第三类是具有蛋白质特性的高分子物质。活化剂对酶反应速度的影响类似于底物浓度,但在实际生产中很少使用。
6.存储环境的影响
酶制剂在低温下处于休眠状态。要长期保存酶制剂而不失去其活性,酶制剂的活性在 10°C 下会损失 5-10%/6 个月,在室温下会损失 10-15%/6 个月。因此,关键是干燥和低温。热和光很容易使酶失活。因此,酶制剂应密封保存在低温避光的容器中。此外,酵素制剂的水分含量越高,就越容易失去活性。因此,粉末状酶制剂通常更容易储存和运输。此外,一些金属离子也会导致酶失去活性或抑制酶的活性。应避免选择含有金属离子的容器来储存酶制剂。
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