{"id":7258,"date":"2024-08-21T02:41:10","date_gmt":"2024-08-21T02:41:10","guid":{"rendered":"https:\/\/longchangchemical.com\/?p=7258"},"modified":"2026-04-28T10:42:33","modified_gmt":"2026-04-28T10:42:33","slug":"what-are-the-characteristics-and-applications-of-the-various-enzymes-of-ivd-raw-materials","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/longchangchemical.com\/pt\/what-are-the-characteristics-and-applications-of-the-various-enzymes-of-ivd-raw-materials\/","title":{"rendered":"Quais s\u00e3o as caracter\u00edsticas e aplica\u00e7\u00f5es das v\u00e1rias enzimas das mat\u00e9rias-primas de IVD?"},"content":{"rendered":"

Quais s\u00e3o as caracter\u00edsticas e aplica\u00e7\u00f5es das v\u00e1rias enzimas das mat\u00e9rias-primas de IVD?<\/strong><\/h1>\n

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Resposta r\u00e1pida:<\/strong> Enzimas e ingredientes para processamento de alimentos s\u00e3o geralmente selecionados por ajuste ao substrato, janela de pH e temperatura, dosagem e se a especifica\u00e7\u00e3o de uso final \u00e9 aceit\u00e1vel para o processo alvo. A escolha comercial mais forte \u00e9 aquela que tem desempenho consistente sob condi\u00e7\u00f5es reais de processamento.<\/p>\n

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A Rea\u00e7\u00e3o em Cadeia da Polimerase (PCR) \u00e9 uma t\u00e9cnica de biologia molecular usada para amplificar fragmentos espec\u00edficos de DNA, que \u00e9 considerada uma replica\u00e7\u00e3o de DNA fora do organismo, por meio da qual quantidades m\u00ednimas de fragmentos de DNA s\u00e3o amplificadas a tal ponto que podem ser facilmente identificadas e reconhecidas.<\/p>\n

Nas rea\u00e7\u00f5es de PCR, as \"enzimas\" desempenham um papel fundamental, e cada tipo de \"enzima\" tem uma atividade e uma fun\u00e7\u00e3o diferentes. Ent\u00e3o, quais s\u00e3o os tipos de enzimas existentes? E quais s\u00e3o as aplica\u00e7\u00f5es no campo de IVD?<\/p>\n

DNA polimerase<\/strong><\/p>\n

Defini\u00e7\u00e3o: \u00c9 um tipo de enzima que usa o DNA como molde, replica-se da extremidade 5-terminal para a extremidade 3-terminal do DNA e catalisa a polimeriza\u00e7\u00e3o das mol\u00e9culas de dNTP do substrato para formar o DNA secund\u00e1rio.<\/p>\n

Principais atividades e fun\u00e7\u00f5es: catalisar a s\u00edntese de DNA. 1, polimeriza\u00e7\u00e3o. 2, 3, \u2192 5, atividade de exonuclease - fun\u00e7\u00e3o de revis\u00e3o 3, 5, \u2192 3, atividade de exonuclease - fun\u00e7\u00e3o de reparo de excis\u00e3o 4, fun\u00e7\u00e3o de hidr\u00f3lise de pirofosfato 5, troca de pirofosfato.<\/p>\n

As polimerases de DNA comuns no campo de IVD incluem: Enzima Taq hot-start, que usa modifica\u00e7\u00e3o qu\u00edmica para encerrar a atividade da enzima Taq antes que o sistema de rea\u00e7\u00e3o seja aquecido a 70\u00b0C, inibindo assim a amplifica\u00e7\u00e3o n\u00e3o espec\u00edfica. DNA polimerase de alta fidelidade, contendo um centro de polimeriza\u00e7\u00e3o e um centro de clivagem, o centro de polimeriza\u00e7\u00e3o tem uma atividade de polimerase 5\u2032-3\u2032, respons\u00e1vel pela polimeriza\u00e7\u00e3o; o centro de clivagem tem uma atividade de exonuclease 3\u2032-5\u2032 (tamb\u00e9m conhecida como atividade de revis\u00e3o), respons\u00e1vel pela excis\u00e3o dos nucleot\u00eddeos n\u00e3o pareados. O centro de clivagem tem uma atividade de exonuclease (tamb\u00e9m conhecida como atividade de revis\u00e3o), respons\u00e1vel pela excis\u00e3o de nucleot\u00eddeos n\u00e3o pareados.<\/p>\n

transcriptase reversa<\/strong><\/p>\n

Defini\u00e7\u00e3o: Uma enzima que usa o RNA como molde e sintetiza uma \u00fanica fita de DNA complementar ao molde de RNA na dire\u00e7\u00e3o 5\u2032-3\u2032.<\/p>\n

Principais atividades e fun\u00e7\u00f5es: 1. Atividade de DNA polimerase dirigida por RNA. 2. Atividade da RNase H. 3. Atividade da DNA polimerase direcionada ao DNA.<\/p>\n

Aplica\u00e7\u00e3o no campo de IVD: 1, rea\u00e7\u00e3o em cadeia da polimerase com transcri\u00e7\u00e3o reversa (RT-PCR) 2, constru\u00e7\u00e3o de biblioteca de cDNA 3, sequenciamento de RNA 4, RT-qPCR , 2019 New Crown Nucleic Acid Detection configured system reagents, inevitavelmente se juntar\u00e1 \u00e0 transcriptase reversa. Isso se deve ao fato de que os v\u00edrus de RNA devem ser transcritos reversamente para o DNA a fim de realizar rea\u00e7\u00f5es de PCR.<\/p>\n

RNA polimerase<\/strong><\/p>\n

Defini\u00e7\u00e3o: uma cadeia de DNA ou RNA como modelo de polimerase, porque na c\u00e9lula com a informa\u00e7\u00e3o gen\u00e9tica da transcri\u00e7\u00e3o do DNA, tamb\u00e9m conhecida como transcriptase.<\/p>\n

Principais atividades e fun\u00e7\u00f5es: 1, com o DNA como molde; 2, catalisa a s\u00edntese de \u00e1cidos nucleicos por meio de rea\u00e7\u00f5es de polimeriza\u00e7\u00e3o; 3, faz com que os nucleot\u00eddeos formem liga\u00e7\u00f5es 3,\u21925,-fosfodi\u00e9ster; 4, transcreve a sequ\u00eancia do molde na dire\u00e7\u00e3o 5\u2032-3\u2032 de acordo com o princ\u00edpio do emparelhamento complementar de bases.<\/p>\n

As polimerases de RNA comuns no campo de IVD incluem a polimerase de RNA T7, que catalisa especificamente o processo de forma\u00e7\u00e3o de RNA na dire\u00e7\u00e3o 5'\u21923\u2032. Atualmente, no diagn\u00f3stico in vitro, a tecnologia SAT \u00e9 a aplica\u00e7\u00e3o da polimerase de RNA T7 para amplifica\u00e7\u00e3o de RNA. Essa tecnologia tem sido amplamente utilizada na detec\u00e7\u00e3o de pat\u00f3genos, triagem de v\u00edrus sangu\u00edneos e detec\u00e7\u00e3o microbiana ambiental.<\/p>\n

Proteinase K<\/strong><\/p>\n

Defini\u00e7\u00e3o: A proteinase K \u00e9 uma enzima proteol\u00edtica potente isolada da Candida albicans e \u00e9 um reagente essencial para a extra\u00e7\u00e3o de DNA.<\/p>\n

Fun\u00e7\u00e3o principal: degradar as prote\u00ednas da membrana e as prote\u00ednas ligadas ao DNA e promover a libera\u00e7\u00e3o do DNA. Aplica\u00e7\u00e3o no campo de IVD: para o isolamento e a extra\u00e7\u00e3o de plasm\u00eddeo, DNA gen\u00f4mico e RNA. Na detec\u00e7\u00e3o de \u00e1cido nucleico viral, a proteinase K pode clivar e inativar as prote\u00ednas do caps\u00eddeo viral, liberando o genoma viral para concluir a extra\u00e7\u00e3o do \u00e1cido nucleico.<\/p>\n

Enzima UDG<\/strong><\/p>\n

Defini\u00e7\u00e3o: tamb\u00e9m conhecido como uracil-DNA glicosilase, uracil-N-glicosilase ou UNGase. \u00c9 a estrutura qu\u00edmica que forma os mon\u00f4meros de DNA e RNA e codifica as informa\u00e7\u00f5es gen\u00e9ticas.<\/p>\n

Fun\u00e7\u00e3o: Controle eficiente da contamina\u00e7\u00e3o residual por PCR. Aplica\u00e7\u00e3o em IVD: Os reagentes de PCR para testes cl\u00ednicos cont\u00eam a enzima UDG para evitar a contamina\u00e7\u00e3o.<\/p>\n

Endonuclease<\/b><\/p>\n

Defini\u00e7\u00e3o: classe de enzimas que reconhecem uma sequ\u00eancia espec\u00edfica de nucleot\u00eddeos e clivam a liga\u00e7\u00e3o fosfodi\u00e9ster entre dois desoxirribonucleot\u00eddeos em um local espec\u00edfico de cada cadeia, denominadas enzimas de restri\u00e7\u00e3o.<\/p>\n

Fun\u00e7\u00e3o: h\u00e1 tr\u00eas tipos: tipo 1: modifica\u00e7\u00e3o e clivagem de reconhecimento, o local de clivagem est\u00e1 distante da sequ\u00eancia de reconhecimento. tipo 2: clivagem somente de reconhecimento, o local de clivagem \u00e9 a sequ\u00eancia de reconhecimento. tipo 3: modifica\u00e7\u00e3o e clivagem de reconhecimento, o local de clivagem e a sequ\u00eancia de reconhecimento est\u00e3o mais pr\u00f3ximos.<\/p>\n

Aplica\u00e7\u00f5es no campo de IVD: 1, localiza\u00e7\u00e3o e isolamento de genes, 2, an\u00e1lise da sequ\u00eancia de bases moleculares do DNA, 3, edi\u00e7\u00e3o de engenharia gen\u00e9tica, 4, forma\u00e7\u00e3o do mapa f\u00edsico do DNA.<\/p>\n

Enzima desconjugadora<\/strong><\/p>\n

Defini\u00e7\u00e3o: usar a energia fornecida pela hidr\u00f3lise de ATP para desfazer as liga\u00e7\u00f5es de hidrog\u00eanio formadas pelo emparelhamento de nucleot\u00eddeos de DNA de fita dupla para formar DNA de fita simples.<\/p>\n

Fun\u00e7\u00e3o: desempenha uma fun\u00e7\u00e3o na catalisa\u00e7\u00e3o da desconvolu\u00e7\u00e3o do DNA ou RNA durante a replica\u00e7\u00e3o do DNA ou RNA.<\/p>\n

Aplica\u00e7\u00e3o no campo de IVD: Tecnologia de amplifica\u00e7\u00e3o isot\u00e9rmica, usando enzima desconjugadora estabilizada pelo calor em vez do processo de desnatura\u00e7\u00e3o t\u00e9rmica na qPCR, para desfazer a fita dupla e estender a amplifica\u00e7\u00e3o. Essa t\u00e9cnica \u00e9 menos propensa \u00e0 amplifica\u00e7\u00e3o n\u00e3o espec\u00edfica e tamb\u00e9m evita o processo de eleva\u00e7\u00e3o e redu\u00e7\u00e3o da temperatura no ciclo de PCR, exigindo apenas equipamentos simples para detec\u00e7\u00e3o.<\/p>\n

Enzima modificadora<\/strong><\/p>\n

Defini\u00e7\u00e3o: Uma enzima que catalisa a incorpora\u00e7\u00e3o de bases raras no RNA ou no DNA ou modifica as bases originais para evitar a destrui\u00e7\u00e3o por endonucleases de restri\u00e7\u00e3o.<\/p>\n

Fun\u00e7\u00e3o: Modifica\u00e7\u00e3o covalente da estrutura de outras enzimas para que elas se transformem umas nas outras entre uma forma altamente ativa e uma forma relativamente menos ativa.<\/p>\n

Aplica\u00e7\u00e3o em IVD: Ensaio de atividade da enzima modificadora de \u00e1cido nucleico 5mC\/m6A O m\u00e9todo HTMR fornece evid\u00eancias s\u00f3lidas para a descoberta e avalia\u00e7\u00e3o da atividade de moduladores de mol\u00e9culas pequenas que t\u00eam como alvo a metila\u00e7\u00e3o de DNA\/RNA.<\/p>\n

Pirofosfatase<\/strong><\/p>\n

DEFINI\u00c7\u00c3O: uma enzima que catalisa a convers\u00e3o de uma mol\u00e9cula de pirofosfato em duas mol\u00e9culas de \u00edons fosfato.<\/p>\n

Fun\u00e7\u00e3o: A pirofosfatase inorg\u00e2nica est\u00e1vel ao calor ainda \u00e9 100% ativa quando aquecida a 100\u00b0C por 4 horas, portanto, pode ser usada em rea\u00e7\u00f5es de PCR para eliminar a inibi\u00e7\u00e3o da PCR pelo pirofosfato inorg\u00e2nico gerado e aumentar a replica\u00e7\u00e3o do DNA.<\/p>\n

anticorpo taq<\/b><\/p>\n

Defini\u00e7\u00e3o: Anticorpo contra a Taq DNA polimerase.<\/p>\n

Fun\u00e7\u00e3o: Durante a amplifica\u00e7\u00e3o da PCR, o anticorpo Taq se liga \u00e0 enzima Taq para inibir a atividade da DNA polimerase antes da desnatura\u00e7\u00e3o em alta temperatura e pode inibir efetivamente o recozimento n\u00e3o espec\u00edfico dos primers e a amplifica\u00e7\u00e3o n\u00e3o espec\u00edfica causada pelo d\u00edmero do primer em baixa temperatura.<\/p>\n

Aplica\u00e7\u00e3o em IVD: A alta efici\u00eancia de conten\u00e7\u00e3o do anticorpo Taq pode melhorar a sensibilidade de detec\u00e7\u00e3o do novo kit de detec\u00e7\u00e3o de \u00e1cido nucleico do coronav\u00edrus e ajudar na detec\u00e7\u00e3o do novo coronav\u00edrus.<\/p>\n

O processo padr\u00e3o de PCR \u00e9 dividido em tr\u00eas etapas: Desnatura\u00e7\u00e3o do DNA, recozimento e extens\u00e3o. A rea\u00e7\u00e3o de inativa\u00e7\u00e3o pode ocorrer no in\u00edcio da PCR por meio do aquecimento a 50 \u00b0C por 10 minutos ou 95 \u00b0C por 2 minutos, e a enzima UDG elimina a amplifica\u00e7\u00e3o gerada pelo DNA contaminante no sistema de rea\u00e7\u00e3o. Posteriormente, o DNA modelo \u00e9 desnaturado em DNA de fita simples por meio de alta temperatura. Dois primers se unem a duas fitas de DNA modelo, respectivamente, sob DNA polimerase e temperatura adequada. Os primers s\u00e3o novamente estendidos sob a a\u00e7\u00e3o da DNA polimerase. O anticorpo Taq se liga \u00e0 enzima Taq para inibir a atividade da DNA polimerase e inibir a amplifica\u00e7\u00e3o n\u00e3o espec\u00edfica em baixas temperaturas. A adi\u00e7\u00e3o de pirofosfatase inorg\u00e2nica \u00e0 rea\u00e7\u00e3o de PCR hidrolisa o pirofosfato em ortofosfato, aumentando a efici\u00eancia da amplifica\u00e7\u00e3o da rea\u00e7\u00e3o.<\/p>\n

Em 2020, diante da enorme demanda por testes de \u00e1cido nucleico, a demanda do mercado por reagentes de diagn\u00f3stico molecular aumentou drasticamente e, como resultado, o setor de enzimas de mat\u00e9ria-prima se desenvolveu rapidamente. Em termos de produ\u00e7\u00e3o, devido ao alto limiar t\u00e9cnico da produ\u00e7\u00e3o de enzimas de mat\u00e9ria-prima para testes moleculares, o mercado dom\u00e9stico atual depende principalmente de importa\u00e7\u00f5es. Nos \u00faltimos anos, juntamente com o aumento do processo de produ\u00e7\u00e3o nacional, v\u00e1rias empresas de mat\u00e9ria-prima foram listadas e as categorias de produtos tamb\u00e9m foram gradualmente enriquecidas, mas \u00e9 ineg\u00e1vel que o setor nacional de mat\u00e9rias-primas para Diagn\u00f3stico in vitro ainda est\u00e1 nos est\u00e1gios iniciais de desenvolvimento, a participa\u00e7\u00e3o de mercado tamb\u00e9m \u00e9 relativamente pequena e o futuro est\u00e1 fadado a ter um espa\u00e7o maior para melhorias.<\/p>\n

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How buyers usually evaluate enzyme and food-processing ingredients<\/h2>\n

Em projetos de enzimas e processamento de alimentos, o referencial de decis\u00e3o mais \u00fatil geralmente \u00e9 a adequa\u00e7\u00e3o da aplica\u00e7\u00e3o mais a estabilidade do processo: qual ingrediente funciona sob as condi\u00e7\u00f5es pretendidas de pH, temperatura, tempo e substrato sem criar um problema de qualidade ou conformidade a jusante.<\/p>\n