{"id":4557,"date":"2021-04-29T10:10:14","date_gmt":"2021-04-29T10:10:14","guid":{"rendered":"https:\/\/longchangchemical.com\/?p=4557"},"modified":"2024-09-28T11:56:32","modified_gmt":"2024-09-28T11:56:32","slug":"immobilized-on-magnetic-silicon-based-materials","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/longchangchemical.com\/fr\/immobilized-on-magnetic-silicon-based-materials\/","title":{"rendered":"Param\u00e8tres exp\u00e9rimentaux de la naringinase immobilis\u00e9e sur des mat\u00e9riaux magn\u00e9tiques \u00e0 base de silicium"},"content":{"rendered":"

1. M\u00e9thode de d\u00e9tection de l'activit\u00e9 enzymatique de la naringinase<\/strong><\/h1>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

1-1 M\u00e9thode du spectrophotom\u00e8tre<\/h3>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

La m\u00e9thode spectrophotom\u00e9trique au para-nitroph\u00e9nol utilise le p-nitroph\u00e9nol- \u03b1-rhamnoside ( pNP- \u03b1- Rha ) et le p-nitroph\u00e9nol-\u03b2-D-glucopyranoside ( pNP- \u03b2-Glu) comme substrat, pour d\u00e9tecter l'activit\u00e9 enzymatique de l'\u03b1-rhamnosidase et de la \u03b2-glucosidase. Li Ping a utilis\u00e9 la m\u00e9thode du spectrophotom\u00e8tre p-nitroph\u00e9nol, dans l'exp\u00e9rience d'ajout de la \u03b2-glucosidase d'Aspergillus niger dans la solution de p-nitroph\u00e9nol -\u03b2-glucoside ( pNPG ) pour l'hydrolyse enzymatique, et la valeur de l'absorbance a \u00e9t\u00e9 mesur\u00e9e \u00e0 une longueur d'onde ultraviolette de 400 nm. Sur la base de la valeur de l'absorbance, ils calculent l'activit\u00e9 enzymatique de la \u03b2-glucosidase. Cette m\u00e9thode a une forte sp\u00e9cificit\u00e9 de substrat, mais le substrat standard est cher, et l'activit\u00e9 enzymatique de la naringinase pour hydrolyser les glycosides dans les aliments ne peut pas \u00eatre d\u00e9termin\u00e9e, de sorte que cette m\u00e9thode n'est pas adapt\u00e9e \u00e0 la d\u00e9tection de l'activit\u00e9 enzymatique dans la pr\u00e9paration industrielle \u00e0 grande \u00e9chelle de la naringinase.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

Le principe de la m\u00e9thode du spectrophotom\u00e8tre de Davis est que la naringine peut subir une r\u00e9action chromog\u00e8ne avec le di\u00e9thyl\u00e8ne glycol 90% dans des conditions l\u00e9g\u00e8rement alcalines, et la production de chalcone jaune de naringine peut \u00eatre d\u00e9tect\u00e9e sous une lumi\u00e8re ultraviolette d'une longueur d'onde de 420 nm. Selon la valeur d'absorbance mesur\u00e9e, la quantit\u00e9 restante du substrat naringine peut \u00eatre calcul\u00e9e, puis l'activit\u00e9 naringinase peut \u00eatre obtenue par calcul. Wang Weina et al. ont utilis\u00e9 une m\u00e9thode de Davis am\u00e9lior\u00e9e, ont pris la naringine comme substrat et ont ajout\u00e9 de la naringinase produite par fermentation liquide d'Aspergillus niger FFCC 848 pour l'hydrolyse enzymatique. L'absorbance a \u00e9t\u00e9 mesur\u00e9e sous une lumi\u00e8re ultraviolette de 420 nm, puis l'activit\u00e9 enzymatique a \u00e9t\u00e9 calcul\u00e9e. La m\u00e9thode du spectrophotom\u00e8tre de Davis pour mesurer l'activit\u00e9 enzymatique est simple \u00e0 utiliser et rapide. Cette m\u00e9thode est donc largement utilis\u00e9e pour la d\u00e9tection en temps r\u00e9el de la production de naringinase par fermentation et de l'activit\u00e9 de la naringinase immobilis\u00e9e.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

1-2 Chromatographie liquide \u00e0 haute performance<\/h3>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

Le principe de la chromatographie liquide \u00e0 haute performance (CLHP) est que la CLHP peut d\u00e9terminer avec pr\u00e9cision et analyser quantitativement le substrat naringine, le produit interm\u00e9diaire purunine et le produit final naring\u00e9nine pendant tout le processus d'hydrolyse, puis calculer l'activit\u00e9 enzymatique. Chen Yuelong et d'autres ont utilis\u00e9 la CLHP pour d\u00e9terminer le temps de r\u00e9tention de la naringine, de l'arbutine, de la myric\u00e9tine et de leurs produits, et ont r\u00e9alis\u00e9 une s\u00e9paration compl\u00e8te avec une r\u00e9solution sup\u00e9rieure \u00e0 1,5, et ont contr\u00f4l\u00e9 efficacement l'effet de la naringinase sur de multiples glycosides dans le processus d'hydrolyse, tout en d\u00e9terminant avec pr\u00e9cision l'activit\u00e9 enzymatique. La m\u00e9thode CLHP pr\u00e9sente les avantages d'une grande pr\u00e9cision et peut \u00e9viter l'interf\u00e9rence des impuret\u00e9s, mais compar\u00e9e \u00e0 la m\u00e9thode Davis, cette m\u00e9thode a un temps de d\u00e9tection plus long et une op\u00e9ration plus compliqu\u00e9e.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

1-3 M\u00e9thode am\u00e9lior\u00e9e de d\u00e9termination de l'activit\u00e9 enzymatique de la naringinase<\/h3>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

En utilisant la m\u00e9thode Davis am\u00e9lior\u00e9e : 0,8 ml de 0,8 g-L-1<\/sup>\u00a0Une solution de naringine pr\u00e9par\u00e9e avec un tampon pH 4,5 a \u00e9t\u00e9 ajout\u00e9e au syst\u00e8me r\u00e9actionnel contenant 40 mg de naringinase immobilis\u00e9e (ou 0,2 mL de naringinase libre). Le placer dans un bain-marie \u00e0 temp\u00e9rature constante de 50 \u2103 pendant 30 minutes. Pr\u00e9lever 0,1 mL de la solution d'hydrolyse enzymatique r\u00e9actionnelle et ajouter 5 mL de di\u00e9thyl\u00e8ne glycol (fraction volumique de 90%) et 0,1 mL de solution de NaOH (4 mol-L-1<\/sup>) dans des tubes et laisser reposer pendant 10 minutes apr\u00e8s les avoir m\u00e9lang\u00e9s uniform\u00e9ment. Mesurer l'absorbance de la solution m\u00e9lang\u00e9e \u00e0 420 nm.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

La d\u00e9finition de l'activit\u00e9 de l'enzyme naringinase (U) : \u00e0 une condition de pH 4,5, 50 \u2103, 1 unit\u00e9 d'activit\u00e9 enzymatique est la quantit\u00e9 d'enzyme n\u00e9cessaire pour d\u00e9grader 1 \u03bcg de naringine par minute. Le rapport d'activit\u00e9 enzymatique ( U-g-1<\/sup>\u00a0ou U-mL-1<\/sup>) est d\u00e9finie comme suit : \u00e0 pH 4,5, 50 \u2103, activit\u00e9 enzymatique pr\u00e9sent\u00e9e par 1 g de naringinase immobilis\u00e9e (ou 1 mL de naringinase libre). L'activit\u00e9 enzymatique relative est calcul\u00e9e selon la formule suivante :<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

Activit\u00e9 enzymatique relative \/% = activit\u00e9 enzymatique\/activit\u00e9 enzymatique maximale\u00d7100<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

D\u00e9termination de la courbe standard : la concentration de masse de la solution standard de glycoside naringine est dispos\u00e9e \u00e0 0, 0,4, 0,8, 1,2, 1,6 g - L-1<\/sup>Ensuite, 0,1 mL de la solution a \u00e9t\u00e9 pr\u00e9lev\u00e9 pour r\u00e9agir avec 5 mL de di\u00e9thyl\u00e8ne glycol (90%, v\/v) et 0,1 mL de solution d'hydroxyde de sodium (4 mol-L), puis 0,1 mL de solution d'hydroxyde de sodium (4 mol-L).-1<\/sup>). Apr\u00e8s avoir m\u00e9lang\u00e9 uniform\u00e9ment le m\u00e9lange et l'avoir laiss\u00e9 reposer pendant 10 minutes, la valeur d'absorption de la lumi\u00e8re de la solution m\u00e9lang\u00e9e a \u00e9t\u00e9 mesur\u00e9e \u00e0 420 nm et la courbe standard a \u00e9t\u00e9 trac\u00e9e en cons\u00e9quence.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

2. Pr\u00e9paration de la solution enzymatique de naringinase<\/strong><\/h2>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

L'Aspergillus niger FFCC uv-11 conserv\u00e9 \u00e0 4 \u2103 a \u00e9t\u00e9 transf\u00e9r\u00e9 sur le milieu de culture, et les spores matures ont \u00e9t\u00e9 obtenues par culture \u00e0 temp\u00e9rature constante \u00e0 30 \u2103 pendant 96 h . Ensuite, les spores ont \u00e9t\u00e9 lav\u00e9es avec une solution saline normale st\u00e9rile avec une fraction de masse de 0,9%. La valeur de l'absorbance de la suspension de spores est mesur\u00e9e \u00e0 600 nm (valeur OD600), avec une solution saline st\u00e9rile sa valeur OD600 a \u00e9t\u00e9 ajust\u00e9e \u00e0 0,200. Ensuite, la suspension de spores avec la fraction volumique de 10% a \u00e9t\u00e9 inocul\u00e9e dans 100 ml de milieu de fermentation (fiole conique de 250 ml). Le bouillon de fermentation obtenu a \u00e9t\u00e9 centrifug\u00e9 \u00e0 4 \u2103 et 6000 r-min.-1<\/sup>\u00a0pendant 10 minutes dans une centrifugeuse r\u00e9frig\u00e9r\u00e9e. Puis \u00e0 travers le filtre d'aspiration pour obtenir le liquide surnageant n\u00e9cessaire naringine enzyme fluide. Le r\u00e9frig\u00e9rer \u00e0 4 \u2103 pour une utilisation ult\u00e9rieure.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

3. Pr\u00e9paration de l'enzyme Naringinase immobilis\u00e9e dans le chitosane<\/strong><\/h2>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

Prendre 3,0 g de chitosane, avec 100 ml de fraction volumique de la solution d'acide ac\u00e9tique 2% a \u00e9t\u00e9 dissous pour pr\u00e9parer 0,3 g - L-1<\/sup>\u00a0La solution collo\u00efdale de chitosane a \u00e9t\u00e9 soniqu\u00e9e pendant 20 minutes afin d'\u00e9liminer les bulles d'air et de la laisser se dissoudre compl\u00e8tement. La solution collo\u00efdale de chitosane a \u00e9t\u00e9 inject\u00e9e goutte \u00e0 goutte \u00e0 l'aide d'une aiguille dans 0,5 g - L-1<\/sup>\u00a0NaOH (1000 ml) pour former des granul\u00e9s lisses. Laisser reposer \u00e0 temp\u00e9rature ambiante pendant 3 heures, et les granul\u00e9s ont \u00e9t\u00e9 lav\u00e9s \u00e0 plusieurs reprises avec de l'eau distill\u00e9e jusqu'\u00e0 neutralit\u00e9, et l'eau a \u00e9t\u00e9 absorb\u00e9e par un papier filtre pour obtenir les microsph\u00e8res de chitosane. 0,4 g de microsph\u00e8res de chitosane ont \u00e9t\u00e9 pes\u00e9es, 0,4 ml de glutarald\u00e9hyde avec une fraction de volume de 6% a \u00e9t\u00e9 ajout\u00e9, et les microsph\u00e8res ont \u00e9t\u00e9 lav\u00e9es \u00e0 plusieurs reprises avec de l'eau distill\u00e9e jusqu'\u00e0 ce qu'il n'y ait plus de glutarald\u00e9hyde \u00e0 la surface des microsph\u00e8res apr\u00e8s une temp\u00e9rature constante et une vibration \u00e0 25 \u2103 150 r-min.-1<\/sup>\u00a0Les microsph\u00e8res de chitosane r\u00e9ticul\u00e9es ont \u00e9t\u00e9 obtenues par s\u00e9chage sur papier filtre.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

\u00a0Il dit 0,4 g de microsph\u00e8res de chitosane, ajouter 0,4 mL de num\u00e9ro de membre de cr\u00e9dits 6% glutarald\u00e9hyde, \u00e0 150 r - min-1<\/sup>\u00a0\u00e0 25 \u2103 oscillation de la temp\u00e9rature Apr\u00e8s 2 h, lav\u00e9 \u00e0 plusieurs reprises avec de l'eau distill\u00e9e micro sph\u00e8re \u00e0 la surface de celui-ci n'est pas pentyl Diald\u00e9hyde et le papier filtre sont s\u00e9ch\u00e9s pour obtenir des microsph\u00e8res de chitosane r\u00e9ticul\u00e9. Pr\u00e9lever 4 ml de solution enzymatique de naringinase, l'ajouter \u00e0 0,4 g de microsph\u00e8res de chitosane r\u00e9ticul\u00e9, agiter \u00e0 une temp\u00e9rature constante de 25 \u2103, 150 r-min.-1<\/sup>\u00a0Rincer la solution enzymatique r\u00e9siduelle sur la surface du support avec un tampon pH 4,5, absorber l'eau sur le papier filtre pour obtenir la naringinase immobilis\u00e9e, et la stocker dans un r\u00e9frig\u00e9rateur \u00e0 4 \u2103 pour une utilisation ult\u00e9rieure.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

4. Pr\u00e9paration de microsph\u00e8res magn\u00e9tiques de chitosane \u00e0 base de silicium (MSC)<\/strong><\/h2>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

Le processus de pr\u00e9paration des nanoparticules magn\u00e9tiques \u00e0 base de silicium (MS) est illustr\u00e9 \u00e0 la figure 1.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

Figure 1 Sch\u00e9ma de pr\u00e9paration des nanoparticules magn\u00e9tiques \u00e0 base de silicium<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

( 1) Tout d'abord, le Fe magn\u00e9tique3<\/sub>O4<\/sub>\u00a0modifi\u00e9es par l'acide citrique ont \u00e9t\u00e9 pr\u00e9par\u00e9es par la m\u00e9thode de co-pr\u00e9cipitation chimique, et la proc\u00e9dure exp\u00e9rimentale comprend : 2,25 g de FeCl3<\/sub>-6H2<\/sub>O et 1,61 g de FeSO4<\/sub>-7H2<\/sub>O sont ajout\u00e9s dans un ballon \u00e0 trois cols rempli de 100 mL d'eau d\u00e9ionis\u00e9e, la temp\u00e9rature du syst\u00e8me a \u00e9t\u00e9 chauff\u00e9e \u00e0 85 \u2103 sous l'effet de l'azote gazeux. Agiter sous 1000 r-min-1<\/sup>\u00a0et verser rapidement 10 ml d'eau ammoniaqu\u00e9e concentr\u00e9e. Lorsque la solution devient noire, ajouter 153 mg de citrate de sodium. Apr\u00e8s 30 minutes de r\u00e9action, s\u00e9parer la production \u00e0 l'aide d'un aimant et laver la phase solide avec de l'eau d\u00e9sionis\u00e9e et de l'\u00e9thanol \u00e0 plusieurs reprises. Le Fe3<\/sub>O4<\/sub>\u00a0Les nanoparticules obtenues sont s\u00e9ch\u00e9es en vue d'une utilisation ult\u00e9rieure.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

( 2) Ensuite, des nanoparticules magn\u00e9tiques \u00e0 base de silicium (MS) ont \u00e9t\u00e9 pr\u00e9par\u00e9es par la m\u00e9thode sol-gel, comme le montre la figure 1. Les \u00e9tapes exp\u00e9rimentales sont les suivantes 0,1 g de Fe3<\/sub>O4<\/sub>\u00a0ont \u00e9t\u00e9 uniform\u00e9ment dispers\u00e9es dans une solution mixte contenant 40 ml d'\u00e9thanol anhydre, 10 ml d'eau distill\u00e9e et 1,2 ml d'eau ammoniaqu\u00e9e concentr\u00e9e. Sous une agitation de 300 r-min-1<\/sup>Des gouttelettes de solution contenant du Fe3<\/sub>O4<\/sub>\u00a0ont \u00e9t\u00e9 ajout\u00e9es au TEOS (0,4 ml) dispers\u00e9 dans 30 ml d'\u00e9thanol anhydre, et la r\u00e9action des nanoparticules \u00e0 base de silicium s'est d\u00e9roul\u00e9e pendant 12 heures \u00e0 temp\u00e9rature ambiante. Les produits ont \u00e9t\u00e9 lav\u00e9s plusieurs fois avec de l'\u00e9thanol anhydre et de l'eau distill\u00e9e pour obtenir des nanoparticules magn\u00e9tiques \u00e0 base de silice (MS), qui ont \u00e9t\u00e9 s\u00e9ch\u00e9es en vue d'une utilisation ult\u00e9rieure.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

Les microsph\u00e8res de MSC ont \u00e9t\u00e9 pr\u00e9par\u00e9es par la m\u00e9thode de r\u00e9ticulation en \u00e9mulsion, comme le montre la figure 2. Les \u00e9tapes exp\u00e9rimentales \u00e9taient les suivantes : 0,125 g de nanoparticules de silice magn\u00e9tiques (MS) uniform\u00e9ment dispers\u00e9es dans 10 mL de solution de chitosane avec une fraction massique de 2,5% pr\u00e9par\u00e9e par le chitosane dissous dans une solution d'acide ac\u00e9tique avec une fraction volumique de 5,0%, puis ajouter la solution de chitosane dans une \u00e9mulsion contenant 60 mL de cire de paraffine liquide et 1,8 mL de twain 80 goutte \u00e0 goutte. Apr\u00e8s 30 minutes d'agitation au bain-marie \u00e0 40 \u2103 et \u00e0 800 r-min, la solution de chitosane est m\u00e9lang\u00e9e \u00e0 la cire de paraffine liquide.-1<\/sup>\uff0cadditionner 2,0 mL de glutarald\u00e9hyde et faire r\u00e9agir 1 h. Ensuite, le pH du syst\u00e8me a \u00e9t\u00e9 ajust\u00e9 \u00e0 9,0 avec 1 mol-L-1<\/sup>\u00a0NaOH, et la r\u00e9action a \u00e9t\u00e9 poursuivie pendant 1 h. Les produits ont \u00e9t\u00e9 lav\u00e9s avec de l'\u00e9ther de p\u00e9trole, de l'\u00e9thanol et de l'eau distill\u00e9e \u00e0 plusieurs reprises pour obtenir des microsph\u00e8res MSC, qui ont \u00e9t\u00e9 s\u00e9ch\u00e9es sous vide en vue d'une utilisation ult\u00e9rieure.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

Figure 2 Sch\u00e9ma de pr\u00e9paration des microsph\u00e8res magn\u00e9tiques de chitosane \u00e0 base de silicium<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

5. Pr\u00e9paration de microsph\u00e8res de chitosane magn\u00e9tiques \u00e0 base de silicium et d'\u00e9poxy (MSCE)<\/strong><\/h2>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

0,5 g de microsph\u00e8res de MSC s\u00e9ch\u00e9es pr\u00e9par\u00e9es par la m\u00e9thode 4 ont \u00e9t\u00e9 pes\u00e9es et ajout\u00e9es dans une fiole conique de 50 ml. Ensuite, 2,0 ml de solution de NaOH, de solution d'\u00e9pichrolohydrine et de NaBH4<\/sub>\u00a0ont \u00e9t\u00e9 ajout\u00e9es dans le ballon avec une certaine concentration. La r\u00e9action a \u00e9t\u00e9 effectu\u00e9e par oscillation de la temp\u00e9rature constante pendant un certain temps. Le m\u00e9canisme de r\u00e9action de la pr\u00e9paration du MSCE est illustr\u00e9 \u00e0 la figure 3.<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

Figure 3 Principe de pr\u00e9paration des microsph\u00e8res magn\u00e9tiques de chitosane \u00e0 base d'\u00e9poxy et de silicium<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

Apr\u00e8s activation, les microsph\u00e8res activ\u00e9es sont lav\u00e9es \u00e0 plusieurs reprises avec de l'eau distill\u00e9e jusqu'\u00e0 ce qu'il n'y ait plus de groupes OH- et \u00e9poxy libres \u00e0 la surface pour obtenir des microsph\u00e8res de chitosane magn\u00e9tique \u00e0 base de silicium et d'\u00e9poxy (MSCE). La m\u00e9thode de d\u00e9tection est la suivante : prendre 3,0 ml du surnageant de lavage et ajouter 1~2 gouttes de ph\u00e9nolphtal\u00e9ine. Apr\u00e8s agitation, si la ph\u00e9nolphtal\u00e9ine ne vire pas au rouge, cela signifie qu'il n'y a pas d'OH- libre dans le MSCE ; prendre 3,0 mL du surnageant de lavage et ajouter 3,0 mL de 1,3 mol-L-1<\/sup>\u00a0thiosulfate de sodium et 1 ~2 gouttes de ph\u00e9nolphtal\u00e9ine, si la solution ne devient pas rouge apr\u00e8s agitation, cela signifie qu'il n'y a pas de groupes \u00e9poxy libres dans le MSCE. L'\u00e9quation de r\u00e9action de la d\u00e9tection du groupe \u00e9poxy est la suivante :<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

6 Pr\u00e9paration de l'enzyme naringinase immobilis\u00e9e dans le MSCE<\/strong><\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

5,0 g de MSCE pr\u00e9par\u00e9 par la m\u00e9thode 5 ont \u00e9t\u00e9 ajout\u00e9s \u00e0 50 ml de solution enzymatique de naringinase avec un certain pH, et la r\u00e9action a \u00e9t\u00e9 oscill\u00e9e sous un bain-marie \u00e0 temp\u00e9rature constante, comme le montre la figure 4. Apr\u00e8s la r\u00e9action, les microsph\u00e8res ont \u00e9t\u00e9 lav\u00e9es plusieurs fois avec une solution tampon jusqu'\u00e0 ce qu'il n'y ait plus de naringinase libre \u00e0 la surface des microsph\u00e8res. Les microsph\u00e8res ont \u00e9t\u00e9 drain\u00e9es par un entonnoir Brinella pour obtenir l'enzyme naringinase immobilis\u00e9e par MSCE, qui a \u00e9t\u00e9 r\u00e9frig\u00e9r\u00e9e \u00e0 4 \u2103 pour une utilisation ult\u00e9rieure.\u00a0<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n
\"\"<\/figure>\r\n\r\n\r\n\r\n

Figure 4 Le principe de pr\u00e9paration de l'enzyme naringinase immobilis\u00e9e par MSCE<\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n

Contactez-nous d\u00e8s maintenant !<\/b><\/strong><\/h2>\r\n

Si vous avez besoin de Price, veuillez indiquer vos coordonn\u00e9es dans le formulaire ci-dessous. Nous vous contacterons g\u00e9n\u00e9ralement dans les 24 heures. Vous pouvez \u00e9galement m'envoyer un courriel\u00a0info@longchangchemical.com<\/a><\/span>\u00a0pendant les heures de travail ( 8:30 am to 6:00 pm UTC+8 Mon.~Sat. ) ou utilisez le chat en direct du site web pour obtenir une r\u00e9ponse rapide.<\/b><\/strong><\/h4>\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n\r\n
Compos\u00e9 Glucoamylase<\/span><\/a><\/td>\r\n9032-08-0<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
Pullulanase<\/span><\/a><\/td>\r\n9075-68-7<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
Xylanase<\/span><\/a><\/td>\r\n37278-89-0<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
Cellulase<\/span><\/a><\/td>\r\n9012-54-8<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
Naringinase<\/span><\/a><\/td>\r\n9068-31-9<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
\u03b2-Amylase<\/span><\/a><\/td>\r\n9000-91-3<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
Glucose oxydase<\/span><\/a><\/td>\r\n9001-37-0<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
alpha-amylase<\/td>\r\n9000-90-2<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
Pectinase<\/span><\/a><\/td>\r\n9032-75-1<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
Peroxydase<\/td>\r\n9003-99-0<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
Lipase<\/span><\/a><\/td>\r\n9001-62-1<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
Catalase<\/span><\/a><\/td>\r\n9001-05-2<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
TANNASE<\/span><\/a><\/td>\r\n9025-71-2<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
Elastase<\/span><\/a><\/td>\r\n39445-21-1<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
Ur\u00e9ase<\/span><\/a><\/td>\r\n9002-13-5<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
DEXTRANASE<\/span><\/a><\/td>\r\n9025-70-1<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
L-Lactique d\u00e9shydrog\u00e9nase<\/span><\/a><\/td>\r\n9001-60-9<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
D\u00e9shydrog\u00e9nase malate<\/span><\/a><\/td>\r\n9001-64-3<\/td>\r\n<\/tr>\r\n
Cholest\u00e9rol oxydase<\/span><\/a><\/td>\r\n9028-76-6<\/td>\r\n<\/tr>\r\n<\/tbody>\r\n<\/table>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

1. M\u00e9thode de d\u00e9tection de l'activit\u00e9 enzymatique de la naringinase 1-1 M\u00e9thode spectrophotom\u00e9trique La m\u00e9thode spectrophotom\u00e9trique au para-nitroph\u00e9nol utilise le p-nitroph\u00e9nol- \u03b1-rhamnoside ( pNP- \u03b1- Rha ) et le p-nitroph\u00e9nol-\u03b2-D-glucopyranoside ( pNP- \u03b2-Glu) comme substrat, pour d\u00e9tecter l'activit\u00e9 enzymatique de l'\u03b1-rhamnosidase et de la \u03b2-glucosidase. Li Ping a utilis\u00e9 la m\u00e9thode du spectrophotom\u00e8tre p-nitroph\u00e9nol, dans l'exp\u00e9rience d'ajout de la \u03b2-glucosidase d'Aspergillus niger dans la solution de p-nitroph\u00e9nol -\u03b2-glucoside ( pNPG ) pour l'hydrolyse enzymatique, et la valeur de l'absorbance a \u00e9t\u00e9 mesur\u00e9e \u00e0 [...]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[108],"tags":[],"class_list":["post-4557","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-enzyme-news"],"yoast_head":"\nExperimental parameters of\u00a0naringinase immobilized on magnetic silicon based materials - Longchang Chemical<\/title>\n<meta name=\"robots\" content=\"index, follow, max-snippet:-1, max-image-preview:large, max-video-preview:-1\" \/>\n<link rel=\"canonical\" href=\"https:\/\/longchangchemical.com\/fr\/immobilized-on-magnetic-silicon-based-materials\/\" \/>\n<meta property=\"og:locale\" content=\"fr_FR\" \/>\n<meta property=\"og:type\" content=\"article\" \/>\n<meta property=\"og:title\" content=\"Experimental parameters of\u00a0naringinase immobilized on magnetic silicon based materials - 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