<\/p>\n
Quick answer:<\/strong> Enzyme and food-processing ingredients are usually selected by substrate fit, pH and temperature window, dosage, and whether the end-use specification is acceptable for the target process. The strongest commercial choice is the one that performs consistently under real processing conditions.<\/p>\n <\/p>\n 1. die Herstellung von Enzymen<\/strong><\/p>\n Enzyme werden aus Mikroorganismen, Tieren und Pflanzen gewonnen, aber die Hauptquelle sind Mikroorganismen. Da Mikroorganismen mehr Vorteile als Pflanzen und Tiere haben, werden in der Regel ausgezeichnete enzymproduzierende St\u00e4mme ausgew\u00e4hlt, um Enzyme durch Fermentation zu produzieren. Um die Enzymkonzentration in der Fermentationsbr\u00fche zu erh\u00f6hen, werden hervorragende St\u00e4mme ausgew\u00e4hlt, gentechnisch ver\u00e4nderte Bakterien entwickelt und die Fermentationsbedingungen optimiert. Die industrielle Produktion erfordert besondere Leistungen neuer Enzyme, wie z. B. hochtemperaturbest\u00e4ndige \u03b1-Amylase, alkaliresistente Protease und Lipase usw. Daher m\u00fcssen wir St\u00e4mme erforschen und entwickeln, die eine besondere Leistung neuer Enzyme erbringen.<\/p>\n 2. die Zubereitung von Enzymen<\/strong><\/p>\n Die Technologie der Enzymabtrennung und -reinigung ist das Herzst\u00fcck des aktuellen biotechnologischen \"Nachbehandlungsprozesses\". Mit einer Vielzahl von Trennungs-und Reinigungstechniken, von mikrobiellen Zellen und ihre Fermentationsbr\u00fche, oder tierischen und pflanzlichen Zellen und ihre Kulturbr\u00fche in der Trennung und Reinigung von Enzymen, von hochaktiven Enzympr\u00e4parate von unterschiedlicher Reinheit gemacht, um Enzympr\u00e4parate weiter in allen Aspekten der Volkswirtschaft verwendet werden, m\u00fcssen die Aktivit\u00e4t von Enzympr\u00e4paraten, Reinheit und Ausbeute zu verbessern, die Notwendigkeit, die neue Trennung und Reinigungstechniken zu studieren.<\/p>\n 3. die Immobilisierung von Enzymen und Zellen<\/strong><\/p>\n Die Forschung zur Immobilisierung von Enzymen und Zellen ist die zentrale Aufgabe der Enzymtechnik. Um die Stabilit\u00e4t von Enzymen zu verbessern, Enzympr\u00e4parate wiederzuverwenden, den Anwendungsbereich von Enzympr\u00e4paraten zu erweitern, wird eine Vielzahl von Immobilisierungsmethoden f\u00fcr die Immobilisierung von Enzymen verwendet, die Herstellung von immobilisierten Enzymen, wie z.B. immobilisierte Glukose-Isomerase, immobilisierte Carbamoylase, usw., die Bestimmung von immobilisierten Enzymen und immobilisierten Enzymen f\u00fcr die Anwendung verschiedener Aspekte der Entwicklung der Forschung. Immobilisierte Enzyme haben nach wie vor eine starke Vitalit\u00e4t. Es wird von verschiedenen Bereichen wie Biochemie, Chemietechnik, Mikrobiologie, Polymere und Medizin sehr gesch\u00e4tzt.<\/p>\n Immobilisierte Zellen werden auf der Grundlage von immobilisierten Enzymen entwickelt. F\u00fcr die Immobilisierung von mikrobiellen, tierischen und pflanzlichen Zellen werden verschiedene Immobilisierungsmethoden verwendet, um eine Vielzahl immobilisierter biologischer Zellen herzustellen. Die Untersuchung der enzymatischen Eigenschaften immobilisierter Zellen, insbesondere der kinetischen Eigenschaften, sowie die Erforschung und Entwicklung immobilisierter Zellen f\u00fcr verschiedene Anwendungen ist heutzutage ein wichtiges Thema in der Enzymtechnik.<\/p>\n Die Immobilisierungstechnologie ist ein wichtiger Meilenstein in der Modernisierung der Enzymtechnologie. Sie ist eine bahnbrechende Technologie, um die Unzul\u00e4nglichkeiten nat\u00fcrlicher Enzyme in industriellen Anwendungen zu \u00fcberwinden und die Eigenschaften der Enzymreaktion voll zur Geltung zu bringen. Man kann sagen, dass es keine moderne Enzymtechnologie ohne die Entwicklung der Immobilisierungstechnologie gibt.<\/p>\n 4. Molekulare Ver\u00e4nderung von Enzymen<\/strong><\/p>\n Auch bekannt als molekulare Modifikation von Enzymen. Um die Stabilit\u00e4t des Enzyms zu verbessern, die Antigenit\u00e4t zu verringern, die Halbwertszeit von medizinischen Bakterien im K\u00f6rper zu verl\u00e4ngern, werden verschiedene Modifizierungsmethoden verwendet, um die Struktur des Enzymmolek\u00fcls zu ver\u00e4ndern, um ein nat\u00fcrliches Enzym zu schaffen, das nicht \u00fcber einige hervorragende Eigenschaften verf\u00fcgt (wie z. B. h\u00f6here Stabilit\u00e4t, keine Antigenit\u00e4t, Widerstand gegen Protease-Hydrolyse usw.), und sogar eine neue Enzymaktivit\u00e4t zu schaffen, um die Anwendung des Enzyms zu erweitern, um den Wert der Enzymanwendung zu erh\u00f6hen und gr\u00f6\u00dfere wirtschaftliche und soziale Vorteile zu erzielen. und soziale Vorteile.<\/p>\n Die molekulare Modifikation von Enzymen kann unter zwei Gesichtspunkten durchgef\u00fchrt werden:<\/strong><\/p>\n (1) Verwenden Sie die Protein-Engineering-Technologie, um das Gen f\u00fcr die Struktur des Enzymmolek\u00fcls zu modifizieren, in der Erwartung, ein neues Enzym (mutiertes Enzym) mit ausgezeichneten Eigenschaften und hoher Aktivit\u00e4t zu erhalten, das eine angemessene Prim\u00e4rstruktur und Raumstruktur aufweist.<\/p>\n (2) Chemische oder enzymatische Ver\u00e4nderung der Prim\u00e4rstruktur von Enzymproteinen oder chemische Ver\u00e4nderung des Enzymmolek\u00fcls mit chemischer Ver\u00e4nderung der Seitenkettengruppe. Dadurch werden die enzymatischen Eigenschaften ver\u00e4ndert. Diese Enzyme sind besonders n\u00fctzlich f\u00fcr die Grundlagenforschung in der Enzymologie und in der Medizin.<\/p>\n Bei den Mikroorganismen, die f\u00fcr die Herstellung von Enzymen verwendet werden, handelt es sich um Fadenpilze, Hefen und Bakterien in drei gro\u00dfen Gruppen, wobei es sich haupts\u00e4chlich um aerobe Bakterien handelt. Die St\u00e4mme und Verwendungszwecke mehrerer wichtiger industrieller Enzyme sind nachstehend aufgef\u00fchrt:<\/p>\n Amylase<\/strong><\/p>\n Amylasen hydrolysieren St\u00e4rke, um past\u00f6se Malzoligosaccharide und Maltose zu erzeugen. Die Herstellung erfolgt \u00fcberwiegend durch Tiefenfermentation mit Bacillus subtilis und Bacillus licheniformis der Gattung Bacillus, wobei letzterer hitzebest\u00e4ndige Enzyme produziert. Tiefe und halbfeste Fermentationen mit St\u00e4mmen von Aspergillus und Rhizopus werden ebenfalls f\u00fcr die Lebensmittelverarbeitung verwendet [6] . Amylasen werden haupts\u00e4chlich bei der Zuckerherstellung, der Textilentschlichtung, der Behandlung von Fermentationsrohstoffen und der Lebensmittelverarbeitung eingesetzt. Glucoamylase kann St\u00e4rke zu Glukose hydrolysieren, die heute fast ausschlie\u00dflich durch Tiefenfermentation von Aspergillus niger hergestellt wird, und wird in der Zuckerproduktion, der Alkoholproduktion und der Verarbeitung von Fermentationsrohstoffen eingesetzt.<\/p>\n Protease<\/strong><\/p>\n Die Verwendung von St\u00e4mmen und die Produktion der meisten Sorten. Mit Flechten-f\u00f6rmigen Bacillus, kurze kleine Bacillus und Bacillus subtilis, um tiefe G\u00e4rung Produktion von bakteriellen Protease; mit Streptomyces, Aspergillus tiefe G\u00e4rung Produktion von neutralen Protease und Aspergillus saure Protease, f\u00fcr Leder Enthaarung, Pelz Erweichung, Pharmazeutika, die Lebensmittelindustrie verwendet; mit Trichoderma spp. einige der Bakterien in halbfesten G\u00e4rung Produktion von Lab bei der Herstellung von K\u00e4se anstelle von Lab aus dem Magen des urspr\u00fcnglichen Kalb extrahiert.<\/p>\n Glukose-Isomerase<\/strong><\/p>\n Eine Art hat sich in den 70er Jahren rasch entwickelt. Streptomyces-Zellen werden zun\u00e4chst durch tiefe Fermentation gewonnen, und nach der Immobilisierung wird die Glukosel\u00f6sung in einen Sirup umgewandelt, der etwa 50% Fruktose enth\u00e4lt, die in der Lebensmittelindustrie anstelle von Saccharose verwendet werden kann. Mit Amylase, Glucoamylase und Glucose-Isomerase, etc. wird aus Maisst\u00e4rke in Sirup hat sich zu einem der aufstrebenden Zuckerindustrie.<\/p>\n Auswahl der Expressionssysteme 2 Hefe-Expressionssystem (Picrosporum) 3 Die erste Wahl ist das in der Literatur beschriebene Expressionssystem, die zweite Wahl ist das E. coli-System, und das Hefe-System wird verwendet, wenn die Expression in E. coli inaktiv ist. Je nach Quelle des Gens, um das Expressionssystem zu bestimmen, wird das Gen mit Affinit\u00e4ts-Tags versehen, um die Reinigung zu erleichtern.<\/p>\n Enzymatische Ver\u00e4nderung Ab-initio-Entwurfsprozess: 1. Entwicklung eines Kraftfelds und eines Sampling-Algorithmus 2. Hochdurchsatztests 3. Strukturidentifizierung<\/p>\n Gezielte Evolution von Proteinen Methoden zur Erzeugung von Mutantengenbibliotheken Nat\u00fcrliche Evolution: Spontane Mutation, Rekombination, nat\u00fcrliche Selektion DNA-Mischung Techniken der Proteinforschung 2 Proteinexpressionssystem \u2461 Hefeexpressionssystem: kurzer Zyklus, hohe Effizienz, geringe Kosten, posttranslationale Modifikation vorhanden. Es kommt zu einer unangemessenen Glykosylierung, hohe Mannose-Modifikation. Haupts\u00e4chlich f\u00fcr die Herstellung von intrazellul\u00e4ren\/sekretorischen Proteinen, disulfidbindenden Proteinen und glykosylierten Proteinen verwendet.<\/p>\n (iii) Bakteriophagen-Expressionssystem: hohe Genkapazit\u00e4t, proteinl\u00f6slich, geeignet f\u00fcr die Produktion von toxischen Proteinen, posttranslationale Modifikationen \u00e4hnlich wie bei S\u00e4ugetieren. Die Kultivierungsbedingungen sind rau und es fehlen einige Glykosylierungsmodifikationen. Haupts\u00e4chlich verwendet f\u00fcr die Produktion von Membranproteinen, gro\u00dfvolumigen Proteinen, viralen Impfstoffen, Signalproteinen, Zytokinen und Kinasen. \u2463 S\u00e4ugetier-Expressionssysteme: lange Zykluszeit, geringe Effizienz, Vorhandensein posttranslationaler Modifikationen, hohe Bioaktivit\u00e4t der Proteine. Haupts\u00e4chlich f\u00fcr die Herstellung komplexer eukaryotischer Proteine, die pr\u00e4zise PTM erfordern. 3 Proteinaufreinigung Basierend auf biologischen Eigenschaften: Affinit\u00e4tschromatographie<\/p>\n \u2460Dialyse Ultrafiltration \u2462 Gel-Filtrations-Chromatographie Ionenaustauschchromatographie \u2464 Affinit\u00e4tschromatographie Immobilisierte Metallchelatchromatographie (IMAC) mit an Poly-(His) gebundenen Metallionen (Ni 2+; Co 2+; Cu 2+) 6<\/sub> markierte Proteine.<\/p>\n Reinigung von Strep-markierten Proteinen ProteinA\/Protein G-Affinit\u00e4tschromatographie Wie kann das gereinigte Protein identifiziert werden? 4 Elektronenmikroskopie <\/p>\n In enzyme and food-processing projects, the most useful decision frame is usually application fit plus process stability: which ingredient performs under the intended pH, temperature, time, and substrate conditions without creating a downstream quality or compliance problem.<\/p>\n Why is a high-activity enzyme not automatically the best commercial choice?<\/strong> Should food and biotech ingredients be selected from data sheets alone?<\/strong> <\/p>\n 1.Enzyme production Enzymes are produced from microorganisms, animals and plants, but the main source is microorganisms. Since microorganisms have more advantages than plants and animals, generally excellent enzyme-producing strains are<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[108],"tags":[],"class_list":["post-7253","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-enzyme-news"],"yoast_head":"\n
\n1 E. coli-Expressionssystem
\n\u2460pET-Expressionssystem wird bevorzugt
\n\u2461 Die rekombinante Proteinexpression und -reinigung kann unter Verwendung von solubilisierten Tags erfolgen, wobei MBP die erste Wahl ist.
\n\u2462 Bevorzugt pET24 oder pET28 (falls eine Reinigung erforderlich ist) mit BL21(DE3), TB-Medium 37\u00b0, Wachstum auf 1-1,5 OD, 18 \u2103 Wachstum f\u00fcr 1 Stunde auf 3 OD, 0,5 mM IPTG-Induktion f\u00fcr 19 Stunden auf OD bis 10.
\n\u2463 Rettungsma\u00dfnahmen f\u00fcr hohe Expression und geringe L\u00f6slichkeit: Abk\u00fchlung auf bis zu 15 \u2103; Wechsel des Mediums zu 2xYT oder ZYP5052 (selbstinduziert), Wechsel des Expressionswirts; Trunkierung der N-terminalen und\/oder C-terminalen 2-10 Aminos\u00e4urereste; Expression durch Fusion mit hochl\u00f6slichen Proteinen wie MBP; chemische Induktion molekularer Chaperone, Koexpression molekularer Chaperone\/interagierender Proteine oder Bereitstellung von Liganden.
\n\u2464 Vor- und Nachteile des E. coli-Expressionssystems
\nVorteile: am bequemsten, am effektivsten
\nNachteile: schwache F\u00e4higkeit zur Sekretion und Expression; Schwierigkeiten bei der Bildung von Disulfidbindungen; keine posttranslationale Modifikation<\/p>\n
\nVorteile: stabile Integration exogener Gene; der Promotor des Alkoholoxidase-Gens ist stark, und die Expression kann durch Methanol streng reguliert werden; rekombinante Proteine k\u00f6nnen in intrazellul\u00e4rer oder extrazellul\u00e4rer Form exprimiert werden; enth\u00e4lt Funktionen zur posttranslationalen Modifikation, wie sie bei eukaryotischen Expressionssystemen \u00fcblich sind; es gibt kommerzielle Wirte\/Vektoren, die einfach zu handhaben sind; die Amplifikation ist einfach, und die Fermentationsdichte ist extrem hoch.
\nNachteile: einzigartige Form der posttranslationalen Verarbeitung; Problem der \u00fcberm\u00e4\u00dfigen Glykosylierung.<\/p>\n
\n\u2460Rationales Design: basierend auf der Proteinstruktur und den Informationen \u00fcber die Funktion des kodierenden Gens und dem Rekombinations-Expressionstest.
\nVerfahren: Zun\u00e4chst wird die Enzymstruktur aus der BRENDA-Datenbank entnommen, dann die Enzymstruktur modifiziert und die Enzymstruktur mit Alphafold2 vorhergesagt, dann eine Docking-Analyse zwischen Enzym und Ligandenmolek\u00fcl mit der PyMOL-Software durchgef\u00fchrt und schlie\u00dflich die Gensequenzen entsprechend der neuen Enzymstruktur in der Richtung mutiert und dann rekombinant exprimiert, um ein neues Enzym zu erhalten (um die thermische Stabilit\u00e4t, die katalytische Effizienz und die Substratspezifit\u00e4t des Enzyms zu verbessern).
\n\u2461 Irrationales Design: Hochfrequente Mutation oder Rekombination kodierender Sequenzen und rekombinante Expression sowie Hochdurchsatztests<\/p>\n
\n\u2460Auswahl der Original-Gene
\n\u2461Einrichtung einer Bibliothek mit verschiedenen Genmutationen
\nVerkn\u00fcpfung mehrerer mutierter Gene in Vektoren und deren Expression in entsprechenden St\u00e4mmen
\n\u2463 W\u00e4hlen Sie ein hochwertiges mutiertes Gen durch Screening aus und exprimieren Sie das mutierte Gen dann in gro\u00dfen Mengen.<\/p>\n
\n\u2460In vivo hochfrequente Zufallsmutation: Verwendung von E. coli XL1-Red als Genreplikationswirt (defektes DNA-Schadensreparatursystem)
\nBei einer Kultivierung bis zum Plateaustadium tritt im Durchschnitt 1 Basenmutation in 2Kb auf.
\n\u2461Random-Mutagenese-Kit: Mutationsrate 0,1 -1,6% \/PCR, entspricht 1-16 Basenmutationen\/Gen
\n\u2462 Punkt-f\u00fcr-Punkt-S\u00e4ttigungsmutagenese<\/p>\n
\nLandwirtschaftliche Evolution: Spontanmutation, Z\u00fcchtung, Screening
\nEvolution im Labor: Beschleunigte Mutationsrate, molekulare Z\u00fcchtung, Screening<\/p>\n
\nExperimentelle Strategie f\u00fcr das Protein-Engineering
\nW\u00e4hlen Sie das Ausgangsgen aus, um ein Inaktivierungssystem und\/oder eine Screening-Methode zu entwickeln.
\nWenn die Struktur-Funktions-Beziehung bekannt ist, sollten Sie zun\u00e4chst die Methode des rationalen Designs anwenden.
\n\u2462Feinabstimmung von Zufallsmutationen und Hochdurchsatz-Screening
\n\u2463 Entwerfen Sie nur dann von Grund auf neu, wenn es kein geeignetes Ausgangsgen gibt.<\/p>\n
\n1 Physikalische und chemische Eigenschaften im Zusammenhang mit der Abtrennung und Aufreinigung von Proteinen
\nMolekulare Gr\u00f6\u00dfe (Dialyse, Ultrafiltration, Gelfiltration, Zentrifugation)
\n\u2461Molekulare Form (Gradientenzentrifugation, Elektrophorese)
\n(iii) Geladene Eigenschaften (Elektrophorese, Ionenaustauschchromatographie)
\n(iv) Solubilisierungseigenschaften (Versalzung, Ausf\u00e4llung in organischen L\u00f6sungsmitteln)
\n\u2464 Unterschiede in der spezifischen Bindung an Liganden (Immunaffinit\u00e4tschromatographie, Bioaffinit\u00e4tschromatographie, Metallchelat-Affinit\u00e4tschromatographie)
\n(vi) Adsorptionseigenschaften (hydrophobe Chromatographie)
\n(vii) Denaturierung und Denaturierung (Denaturierung und Denaturierung von Harnstoff)<\/p>\n
\n\u2460 Bakterielles Expressionssystem: kurzer Zyklus, hohe Effizienz, geringe Kosten, aber keine posttranslationale Modifikation. Haupts\u00e4chlich verwendet f\u00fcr die Produktion von prokaryotischen Proteinen, einfache eukaryotische Proteine.
\nAuswahl des Expressionsvektors: pet-Serie, pGEX-Serie, PQE30......
\nAuswahl der Expressionsst\u00e4mme: BL21(DE3), Rosetta, M15......
\nInduktionsbedingungen: IPTG-Konzentration, Temperatur und Zeitdauer
\nAufreinigung: Ni-NTA (His-Tag), Strep-Perlen, GST.....<\/p>\n
\nDas Baculovirus-Genom hat eine enorme Kapazit\u00e4t f\u00fcr exogene Geninsertionen von bis zu 38 kb.
\nBaculoviren werden in Insektenzellen produziert und vermehren sich nicht in S\u00e4ugetierzellen.
\nVorteile: Baculoviren k\u00f6nnen effizient in S\u00e4ugetierzelllinien, einschlie\u00dflich Prim\u00e4r- und Stammzellen, transduziert werden.
\nSicherheit (keine Replikation in S\u00e4ugetierzellen) und keine beobachtbaren zytopathischen Wirkungen
\nGefroren gelagerte vortransduzierte Zellen k\u00f6nnen auch als Testpr\u00e4paratzellen verwendet werden
\n\u00dcbertragbarkeit (f\u00fcr die Analyse von pharmakologisch relevanten Zelltypen)
\nSchnelligkeit der Testentwicklung (keine Notwendigkeit, Zeit mit der Herstellung stabiler Zelllinien zu verbringen)<\/p>\n
\nTransiente Expression von Proteinen: PEI- oder Liposomen-Transfektionsreagenzien
\nStabile Zelllinienentwicklung: Flp-In\u2122 Jump-In\u2122 Zellentwicklungsplattformen
\nInduzierbare Expression: Tetracyclin-regulierte Expression
\nExpression durch Viren: lentivirales Expressionssystem f\u00fcr die Funktionsanalyse; adenovirales Expressionssystem f\u00fcr die Proteinproduktion<\/p>\n
\nWarum m\u00fcssen wir Proteine aufreinigen?
\nCharakterisierung der Struktur und Funktion von Proteinen von Interesse.
\n(ii) Untersuchung von Proteinregulierung und Proteininteraktionen
\n\u2462 Antik\u00f6rper erzeugen
\nReinigungsmethoden
\nBasierend auf physikalischen\/chemischen Eigenschaften
\nProteingr\u00f6\u00dfe: Dialyse, Ultrafiltration, Gelfiltrationschromatographie
\nProteinladung: Ionenaustauschchromatographie
\nHydrophobizit\u00e4t von Proteinen: Chromatographie mit hydrophober Wechselwirkung<\/p>\n
\nEinflussfaktoren: MWCO des Dialyseschlauchs; Puffervolumen; Dialysezeit; H\u00e4ufigkeit des Wechsels des Dialysepuffers<\/p>\n
\nZentrifugalfiltration: Die Gr\u00f6\u00dfe der Proteine ist kleiner als die Porengr\u00f6\u00dfe des Filterr\u00f6hrchens, sie werden auf den Boden des R\u00f6hrchens zentrifugiert.<\/p>\n
\nTrennen von Proteinen unterschiedlicher Gr\u00f6\u00dfe<\/p>\n
\nKationenaustauschers\u00e4ule: Gel ist negativ geladen, Protein ist positiv geladen
\nAnionenaustauschers\u00e4ule: Gel ist positiv geladen, Protein ist negativ geladen
\nMittel
\nInerter Tr\u00e4ger: Agarose, Dextran
\nGeladene Gruppen: Carboxymethyl: negativ geladen, Diethylamino: positiv geladen
\nAusgleichende Ionen: negativ geladene Gruppen: H+ oder Na+ positiv geladene Gruppen: OH- oder Cl-
\nSchrittweise oder Gradientenelution von Proteinen durch Erh\u00f6hung der Salzkonzentration oder \u00c4nderung des pH-Werts.<\/p>\n
\nDie Affinit\u00e4tschromatographie ist eine Methode zur Trennung von Biomolek\u00fclen aus einem Gemisch, die auf hochspezifischen makromolekularen Bindungswechselwirkungen zwischen einem Biomolek\u00fcl und einer anderen Substanz beruht.
\nBeispiele: Bindung von Antigenen an Antik\u00f6rper, Bindung von Enzymen an Liganden, Bindung von Glutathion- und GST-Fusionsproteinen, Bindung von Anti-Biotin-Proteinen an biotinbindende Molek\u00fcle und Bindung von Metallionen an Polyhistidin-Fusionsproteine.<\/p>\n
\nBeads k\u00f6nnen Proteine mit dem Strep-Tag spezifisch adsorbieren, und mit Biotin kann das Protein dann von den Beads eluiert werden. (Das Prinzip ist \u00e4hnlich wie beim GST-Pull-Down-Experiment)<\/p>\n
\nGentechnisch hergestelltes Protein A und Protein G k\u00f6nnen spezifisch an die Fc-Region von S\u00e4ugetier-IgG binden. Durch Bindung von Protein A und Protein G an das S\u00e4ulenmaterial k\u00f6nnen IgG und seine Unterklassen und Fragmente durch Affinit\u00e4tschromatographie gereinigt werden.
\nProtein A: Molekulargewicht 42kDa, kodiert durch das Spa-Gen, mit 5 isotypischen Immunglobulin-bindenden Strukturdom\u00e4nen, die jeweils aus 3 Alpha-Helices bestehen.
\nProtein G: mit einem Molekulargewicht von 65 kDa, kodiert durch das spg-Gen, bindet die Fc- und Fab-Segmente des Antik\u00f6rpers sowie das Albumin im Serum. Das gentechnisch ver\u00e4nderte Protein G entfernt die Bindungsstelle f\u00fcr Albumin und beh\u00e4lt nur die Fc-Bindungsdom\u00e4ne, die wirksamer ist als Protein A. Das Protein A\/Protein G ist ein gentechnisch ver\u00e4ndertes Protein, das Albumin bindet.
\nproteinA\/protein G: ist ein gentechnisch hergestelltes Bindungsprotein. Es besteht aus 4 Protein-A- und 2 Protein-G-Immunglobulin-Bindungsdom\u00e4nen, die einen breiteren Bindungsbereich haben als Protein A oder Protein G allein, und vereint deren Vorteile in einem Protein, das f\u00fcr die Reinigung von IgG aus fast allen Spezies eingesetzt werden kann.<\/p>\n
\nSDS-PAGE; HPLC; Massenspektrometrie; Western Blot; Bindungsversuche; Funktionsversuche; Strukturaufkl\u00e4rung.<\/p>\n
\nEinzelteilchen-Kryo-Elektronenmikroskopie (Single-Particle-Analysis, SPA)
\nKryo-Elektronentomographie-Mikroskopie (Kryo-ET)<\/p>\nA practical sourcing checklist for enzyme, biotech, and food-ingredient topics<\/h2>\n
\n
Recommended product references<\/h3>\n
\n
FAQ for buyers and formulators<\/h3>\n
Because the best enzyme is the one that performs reliably under the actual process conditions and gives the desired downstream result without creating new issues.<\/p>\n
It is usually safer to pair the specification review with a pilot or application test because real substrates and process windows can change the result a lot.<\/p>\nKontaktieren Sie uns jetzt!<\/b><\/strong><\/h2>\n
Wenn Sie einen Preis ben\u00f6tigen, tragen Sie bitte Ihre Kontaktdaten in das unten stehende Formular ein. Wir werden uns in der Regel innerhalb von 24 Stunden mit Ihnen in Verbindung setzen. Sie k\u00f6nnen mir auch mailen\u00a0info@longchangchemical.com<\/a><\/span>\u00a0w\u00e4hrend der Gesch\u00e4ftszeiten ( 8:30 bis 18:00 Uhr UTC+8 Mo.~Sa. ) oder nutzen Sie den Live-Chat auf der Website, um eine schnelle Antwort zu erhalten.<\/b><\/strong><\/h4>\n
\n\n
\n Verbindung Glucoamylase<\/span><\/a><\/td>\n 9032-08-0<\/td>\n<\/tr>\n \n Pullulanase<\/span><\/a><\/td>\n 9075-68-7<\/td>\n<\/tr>\n \n Xylanase<\/span><\/a><\/td>\n 37278-89-0<\/td>\n<\/tr>\n \n Cellulase<\/span><\/a><\/td>\n 9012-54-8<\/td>\n<\/tr>\n \n Naringinase<\/span><\/a><\/td>\n 9068-31-9<\/td>\n<\/tr>\n \n \u03b2-Amylase<\/span><\/a><\/td>\n 9000-91-3<\/td>\n<\/tr>\n \n Glukose-Oxidase<\/span><\/a><\/td>\n 9001-37-0<\/td>\n<\/tr>\n \n alpha-Amylase<\/td>\n 9000-90-2<\/td>\n<\/tr>\n \n Pektinase<\/span><\/a><\/td>\n 9032-75-1<\/td>\n<\/tr>\n \n Peroxidase<\/td>\n 9003-99-0<\/td>\n<\/tr>\n \n Lipase<\/span><\/a><\/td>\n 9001-62-1<\/td>\n<\/tr>\n \n Katalase<\/span><\/a><\/td>\n 9001-05-2<\/td>\n<\/tr>\n \n TANNASE<\/span><\/a><\/td>\n 9025-71-2<\/td>\n<\/tr>\n \n Elastase<\/span><\/a><\/td>\n 39445-21-1<\/td>\n<\/tr>\n \n Urease<\/span><\/a><\/td>\n 9002-13-5<\/td>\n<\/tr>\n \n DEXTRANASE<\/span><\/a><\/td>\n 9025-70-1<\/td>\n<\/tr>\n \n L-Milch-Dehydrogenase<\/span><\/a><\/td>\n 9001-60-9<\/td>\n<\/tr>\n \n Dehydrogenase Malat<\/span><\/a><\/td>\n 9001-64-3<\/td>\n<\/tr>\n \n Cholesterin-Oxidase<\/span><\/a><\/td>\n 9028-76-6<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"